實(shí)驗(yàn)室的菌種保存

菌種的保存方式取決于菌種的特性，不同的菌種有不同的保存方式。在普通實(shí)驗(yàn)室 使用方法&最&方便。只需-60?-85℃的冰箱即可：

瓊脂斜面菌種

許多菌株都能在瓊脂斜面上保存(如營養(yǎng)瓊脂、麥芽抽提汁瓊脂），不同的菌株選用不 同的培養(yǎng)基。瓊脂斜面能在試管中或螺帽瓶屮制作，后者可以防止培養(yǎng)基干燥。菌株一 旦生長，就要避光保存在室溫或冰箱中，但必須根據(jù)不同的菌株類型，以一個(gè)月至兩年的 間隔進(jìn)行轉(zhuǎn)接

乳酸菌的保存

乳酸菌不適合在有氧的固體培養(yǎng)基表面生長，適合在液體培養(yǎng)基中保存（如酵母糖白堊石蕊乳或Robertson皰肉培養(yǎng)苯），2?4個(gè)月轉(zhuǎn)接一次。含有牛奶或糖的培養(yǎng)基要加入白堊以防止培養(yǎng)基的pH過低。在酵母糖白堊石蕊乳的凝結(jié)奶層中的細(xì)菌死亡后，白堊 沉淀中仍有活菌株存在。

厭氧菌的保存

厭氧菌不能在有氧的間體培養(yǎng)基表面生長，只能在氧氣較少的環(huán)境下生長，菌種最長要每一年轉(zhuǎn)接一次‘

-60~-85℃玻璃珠保存法

該方法可以對菌株連續(xù)保存，非常實(shí)用，例如為生化測試提供已知的陽性和陰性菌 株。但與凍干保存比較，該方法在資金和能源上的消耗較大。將直徑2?4mm的玻璃珠 分裝到小螺帽瓶中(每瓶最多裝30粒），高壓滅菌。將菌株加人到培養(yǎng)基懸液中制成混懸 液。采用無菌操作將混懸液轉(zhuǎn)人有玻璃珠的無菌瓶中。攪動(dòng)混懸液包被玻璃珠,用無菌 的移液管將多余的懸液移走。對螺帽瓶標(biāo)記后放入有分隔的-60~-85℃箱中保存。 使用不同顏色的玻璃徠有助于菌株的辨別，建議建立菌種保存目錄，以減少取出菌種時(shí) 冰箱的開門時(shí)間、使用時(shí)只需取出一粒玻璃珠,放入含有所需培養(yǎng)基的試管或培養(yǎng)瓶中 培養(yǎng)。在常規(guī)的液體培養(yǎng)基一般需氧菌為營養(yǎng)肉湯,厭氧菌為強(qiáng)化梭狀芽孢桿菌培養(yǎng)基 ，嗜鹽菌為加鹽哲養(yǎng)肉場培養(yǎng)基]中混入15%的甘油得到需要的懸液培養(yǎng)基。整 套保存系統(tǒng)在市場上有售

油保存法

將經(jīng)過瓊臘斜面培養(yǎng)或穿刺培養(yǎng)后的菌株用已滅菌的石蠟或礦物油全部覆蓋[將待 滅菌的石蠟少量分裝到三角瓶中（注不要裝得太多，以免滅菌不徹&底），然后 在160℃干燥箱中滅菌1?2h。用這種方法保存的菡種可以保存幾年不用轉(zhuǎn)接。盡管 Onions及其同事認(rèn)為采用該方法保存的一批真菌會產(chǎn)生非典型菌落,但對于小真菌來 說,這仍是一種非常適合的保存方法。

凍干保存法

該方法是將菌種凍干后保存在密封的真空安瓿瓶中，安瓿瓶可放在室溫或冰箱中保 存。這樣保存的菌種能夠存活許多年。這種方式特別適用于菌種的儲藏和運(yùn)輸。